@misc{EngelBayerUlberetal.2018, author = {Engel, M. and Bayer, H. and Ulber, Roland and Tippk{\"o}tter, Nils}, title = {Kommt es in Elektrofermentationen mit Clostridium acetobutylicum zu einer Eisenlimitierung?}, series = {Chemie Ingenieur Technik}, volume = {90}, journal = {Chemie Ingenieur Technik}, number = {9}, publisher = {Wiley-VCH}, address = {Weinheim}, issn = {0009-286X}, doi = {10.1002/cite.201855047}, pages = {1154}, year = {2018}, abstract = {Das strikt anaerobe Bakterium Clostridium acetobutylicum bildet die L{\"o}semittel Aceton, Butanol und Ethanol (ABE-Fermentation). Im Fall einer Eisenlimitierung kommt es zus{\"a}tzlich zu einer Riboflavinsekretion (RF), was durch die gelbe F{\"a}rbung des Kultur{\"u}berstands erkennbar ist. In dieser Arbeit wurde beobachtet, dass w{\"a}hrend Elektrofermentationen mit C. acetobutylicum bei -600 mV eine gelbe F{\"a}rbung auftritt. Es wurde deshalb untersucht, ob eine Eisenlimitierung im bio-elektrochemischen System (BES) vorliegt. Hierzu wurden die Flavinspezien bei Kultivierungen in Medien mit einer Eisenlimitierung bzw. mit ausreichend Eisen in Serumflaschen sowie im BES mit und ohne angelegtem Potenzial verglichen. In den Serumflaschenversuchen wurden RF und Flavinadenindinukleotid (FAD)-Konzentrationen von ‡ 20 mg L⁻¹ sowie Flavinmononukleotid (FMN)-Konzentrationen von ca. 5 mg L⁻¹ detektiert. Bei ausreichender Eisenverf{\"u}gbarkeit hingegen wurden in den Serumflaschen fast keine Flavine sekretiert. Im BES bei -600 mV hingegen wurde auch in diesen Kultur{\"u}berst{\"a}nden FMN und FAD (1-5 mg L⁻¹ ),jedoch kein RF gemessen. Diese Ergebnisse zeigen, dass die Flavinbildung im BES mit angelegtem Potenzial nicht mit der Flavinbildung unter Eisenlimitierung in Serumflaschen korreliert. Andere Faktoren f{\"u}r eine m{\"o}gliche Flavinbildung werden aktuell n{\"a}her betrachtet.}, language = {de} } @article{AboulnagaZouSelmeretal.2018, author = {Aboulnaga, Elhussiny A. and Zou, Huibin and Selmer, Thorsten and Xian, Mo}, title = {Development of a plasmid-based, tunable, tolC-derived expression system for application in Cupriavidus necator H16}, series = {Journal of Biotechnology}, volume = {274}, journal = {Journal of Biotechnology}, publisher = {Elsevier}, address = {Amsterdam}, issn = {0168-1656}, doi = {10.1016/j.jbiotec.2018.03.007}, pages = {15 -- 27}, year = {2018}, abstract = {Cupriavidus necator H16 gains increasing attention in microbial research and biotechnological application due to its diverse metabolic features. Here we present a tightly controlled gene expression system for C. necator including the pBBR1-vector that contains hybrid promoters originating from C. necator native tolC-promoter in combination with a synthetic tetO-operator. The expression of the reporter gene from these plasmids relies on the addition of the exogenous inducer doxycycline (dc). The novel expression system offers a combination of advantageous features as; (i) high and dose-dependent recombinant protein production, (ii) tight control with a high dynamic range (On/Off ratio), which makes it applicable for harmful pathways or for toxic protein production, (iii) comparable cheap inducer (doxycycline, dc), (iv) effective at low inducer concentration, that makes it useful for large scale application, (v) rapid, diffusion controlled induction, and (vi) the inducer does not interfere within the cell metabolism. As applications of the expression system in C. necator H16, the growth ability on glycerol was enhanced by constitutively expressing the E. coli glpk gene-encoding for glycerol kinase. Likewise, we used the system to overcome the expression toxicity of mevalonate pathway in C. necator H16. With this system, the mevalonate-genes were successfully introduced in the host and the recombinant strains could produce about 200 mg/l mevalonate.}, language = {en} }