TY - JOUR A1 - Ribitsch, D. A1 - Heumann, S. A1 - Trotscha, E. A1 - Herrero Acero, E. A1 - Greimel, K. A1 - Leber, R. A1 - Birger-Gruenberger, R. A1 - Deller, S. A1 - Eiteljoerg, I. A1 - Remler, P. A1 - Weber, Th. A1 - Siegert, Petra A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Donelli, I. A1 - Freddi, G. A1 - Schwab, H. A1 - Guebitz, G. M. T1 - Hydrolysis of polyethyleneterephthalate by p-nitrobenzylesterase from Bacillus subtilis JF - Biotechnology progress Y1 - 2011 SN - 1520-6033 (E-Journal); 8756-7938 (Print) VL - Vol. 27 IS - Iss. 4 SP - 951 EP - 960 PB - Wiley CY - Hoboken ER - TY - CHAP A1 - Tippkötter, Nils A1 - Möhring, S. A1 - Maurer, S. A1 - Roth, J. T1 - Dezentrale Vorbehandlung und Verarbeitung pflanzlicher Reststoffe für Bioraffinerien T2 - Kurzfassungen der Vorträge nach Sessions : Frühjahrstagung der Biotechnologen 2013, 4. - 5. März 2013, Dechema-Haus, Frankfurt am Main Y1 - 2013 SP - 5 CY - Frankfurt am Main ER - TY - JOUR A1 - Scheele, S. A1 - Bongaerts, Johannes A1 - Maurer, K.-H. A1 - Freudl, R. T1 - Sekretion einer Kofaktor-haltigen Oxidase durch Corynebacterium glutamicum JF - Chemie - Ingenieur - Technik (CIT) Y1 - 2009 SN - 1522-2640 (E-Journal); 0009-286X (Print) VL - Vol. 81 IS - Iss. 8 SP - 1309 ER - TY - JOUR A1 - Niehaus, F. A1 - Gabor, E. A1 - Wieland, S. A1 - Siegert, Petra A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Eck, J. T1 - Enzymes for the laundry industries: tapping the vast metagenomic pool of alkaline proteases JF - Microbial biotechnology Y1 - 2011 SN - 1432-0614 (E-Journal); 0171-1741 (Print); 0175-7598 (Print); 0340-2118 (Print) VL - Vol. 4 IS - Iss. 6 SP - 767 EP - 776 PB - Springer CY - Berlin ER - TY - JOUR A1 - Ribitsch, D. A1 - Heumann, S. A1 - Karl, W. A1 - Gerlach, J. A1 - Leber, R. A1 - Birner-Gruenberger, R. A1 - Gruber, K. A1 - Eiteljoerg, I. A1 - Remler, P. A1 - Siegert, Petra A1 - Lange, J. A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Berg, G. A1 - Guebitz, G. M. A1 - Schwab, H. T1 - Extracellular serine proteases from Stenotrophomonas maltophilia: Screening, isolation and heterologous expression in E. coli JF - Journal of biotechnology N2 - A large strain collection comprising antagonistic bacteria was screened for novel detergent proteases. Several strains displayed protease activity on agar plates containing skim milk but were inactive in liquid media. Encapsulation of cells in alginate beads induced protease production. Stenotrophomonas maltophilia emerged as best performer under washing conditions. For identification of wash-active proteases, four extracellular serine proteases called StmPr1, StmPr2, StmPr3 and StmPr4 were cloned. StmPr2 and StmPr4 were sufficiently overexpressed in E. coli. Expression of StmPr1 and StmPr3 resulted in unprocessed, insoluble protein. Truncation of most of the C-terminal domain which has been identified by enzyme modeling succeeded in expression of soluble, active StmPr1 but failed in case of StmPr3. From laundry application tests StmPr2 turned out to be a highly wash-active protease at 45 °C. Specific activity of StmPr2 determined with suc-l-Ala-l-Ala-l-Pro-l-Phe-p-nitroanilide as the substrate was 17 ± 2 U/mg. In addition we determined the kinetic parameters and cleavage preferences of protease StmPr2. KW - Alginate beads KW - Stenotrophomonas maltophilia KW - Detergent protease Y1 - 2012 U6 - https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2011.09.025 SN - 1873-4863 (E-Journal); 0168-1656 (Print) VL - 157 IS - 1 SP - 140 EP - 147 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - JOUR A1 - Ribitsch, D. A1 - Karl, W. A1 - Birner-Gruenberger, R. A1 - Gruber, K. A1 - Eiteljoerg, I. A1 - Remler, P. A1 - Wieland, S. A1 - Siegert, Petra A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Schwab, H. T1 - C-terminal truncation of a metagenome-derived detergent protease for effective expression in E. coli JF - Journal of biotechnology N2 - Recently, a new alkaline protease named HP70 showing highest homology to extracellular serine proteases of Stenotrophomonas maltophilia and Xanthomonas campestris was found in the course of a metagenome screening for detergent proteases (Niehaus et al., submitted for publication). Attempts to efficiently express the enzyme in common expression hosts had failed. This study reports on the realization of overexpression in Escherichia coli after structural modification of HP70. Modelling of HP70 resulted in a two-domain structure, comprising the catalytic domain and a C-terminal domain which includes about 100 amino acids. On the basis of the modelled structure the enzyme was truncated by deletion of most of the C-terminal domain yielding HP70-C477. This structural modification allowed effective expression of active enzyme using E. coli BL21-Gold as the host. Specific activity of HP70-C477 determined with suc-l-Ala-l-Ala-l-Pro-l-Phe-p-nitroanilide as the substrate was 30 ± 5 U/mg compared to 8 ± 1 U/mg of the native enzyme. HP70-C477 was most active at 40 °C and pH 7–11; these conditions are prerequisite for a potential application as detergent enzyme. Determination of kinetic parameters at 40 °C and pH = 9.5 resulted in KM = 0.23 ± 0.01 mM and kcat = 167.5 ± 3.6 s⁻¹. MS-analysis of peptide fragments obtained from incubation of HP70 and HP70-C477 with insulin B indicated that the C-terminal domain influences the cleavage preferences of the enzyme. Washing experiments confirmed the high potential of HP70-C477 as detergent protease. Y1 - 2010 U6 - https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2010.09.947 SN - 1873-4863 (E-Journal); 0168-1656 (Print) VL - 150 IS - 3 SP - 408 EP - 416 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - GEN A1 - Tippkötter, Nils A1 - Maurer, S. A1 - Pasteur, A. A1 - Kampeis, P. A1 - Ulber, Roland T1 - Hochgradient-Magnetseparation von Fermentationsprodukten–FEM Simulation der Filtermatrix T2 - Chemie Ingenieur Technik N2 - Durch den Einsatz magnetisierbarer Partikel lassen sich Stoffwechselprodukte direkt und selektiv aus feststoffreichen Fermentationssuspensionen abtrennen. Im Gegensatz zu klassischen Adsorbermaterialien können magnetisierbare Partikel mit sehr geringen Durchmessern verwendet werden. Zur deren Abtrennung ist jedoch ein hoher Magnetfeldgradient notwendig. Dieser wird in der Regel durch in der Trennkammer bzw. dem Magnetfeld eingebrachte magnetisierbare Drähte realisiert. Bei der Auslegung der Drahtgitter ist ein Kompromiss zwischen Abtrennrate und Durchlässigkeit nötig. Die Ausrichtung der Drähte in Relation zum Magnetfeld, deren Abstand sowie die geometrische Anordnung können hierbei variiert werden. Zum Verständnis der Einflüsse auf das sich ausbildende Magnetfeld und die Fluiddynamik wurden Simulationen mit der Finite-Elemente-Methode durchgeführt und experimentell überprüft. Hierfür wurden die Drähte unter Variation von Anzahl, Richtung und Anordnung in den Hochgradient-Magnetseparator eingebracht. Erste Verifizierungen der Simulationen zeigen, dass die in Magnetfeldrichtung ausgerichteten Drähte (x-Achse) über die geringste Partikelrückhaltefähigkeit verfügen. Die Drähte der y- und z-Achse halten den größten Anteil der Magnetpartikel zurück, wobei die Drähte in y-Richtung den höchsten Feldgradienten ausbilden. Des Weiteren konnte gezeigt werden, dass eine rhomboedrische Drahtanordnung der kubischen vorzuziehen ist. Y1 - 2010 U6 - https://doi.org/10.1002/cite.201050217 SN - 0009-286X SN - 1522-2640 (eISSN) N1 - ProcessNet-Jahrestagung 2010 und 28. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 21. - 23. September 2010, Eurogress Aachen VL - 82 IS - 9 SP - 1361 PB - Wiley-VCH CY - Weinheim ER -