TY - JOUR A1 - Haeger, Gerrit A1 - Bongaerts, Johannes A1 - Siegert, Petra T1 - A convenient ninhydrin assay in 96-well format for amino acid-releasing enzymes using an air-stable reagent JF - Analytical Biochemistry N2 - An improved and convenient ninhydrin assay for aminoacylase activity measurements was developed using the commercial EZ Nin™ reagent. Alternative reagents from literature were also evaluated and compared. The addition of DMSO to the reagent enhanced the solubility of Ruhemann's purple (RP). Furthermore, we found that the use of a basic, aqueous buffer enhances stability of RP. An acidic protocol for the quantification of lysine was developed by addition of glacial acetic acid. The assay allows for parallel processing in a 96-well format with measurements microtiter plates. Y1 - 2022 U6 - https://doi.org/10.1016/j.ab.2022.114819 SN - 1096-0309 IS - 624 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - PAT A1 - Degering, Christian A1 - Wieland, Susanne A1 - Islam, Shohana A1 - Lindner, Claudia A1 - Siegert, Petra A1 - Falkenberg, Fabian A1 - Bongaerts, Johannes T1 - Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend Protease (aus Fictibacillus arsenicus) N2 - Die Erfindung liegt auf dem Gebiet der Enzymtechnologie. Die Erfindung betrifft Proteasen aus Fictibacillus arsenicus, die insbesondere im Hinblick auf den Einsatz in Wasch- und Reinigungsmitteln verwendet werden können, alle hinreichend ähnlichen Proteasen mit einer entsprechend ähnlichen Sequenz zu SEQ ID NO:1 und für sie codierende Nukleinsäuren. Die Erfindung betrifft ferner deren Herstellung sowie Verfahren zur Verwendung dieser Proteasen, deren Verwendung als solche sowie diese enthaltende Mittel, insbesondere Wasch- und Reinigungsmittel. Y1 - 2024 ER - TY - PAT A1 - Degering, Christian A1 - Wieland, Susanne A1 - Islam, Shohana A1 - Lindner, Claudia A1 - Bongaerts, Johannes A1 - Siegert, Petra A1 - Falkenberg, Fabian T1 - Wasch- und Reinigungsmittel enthaltend Protease (aus Metabacillus indicus) N2 - Die Erfindung liegt auf dem Gebiet der Enzymtechnologie. Die Erfindung betrifft Proteasen aus Metabacillus indicus, die insbesondere im Hinblick auf den Einsatz in Wasch- und Reinigungsmitteln verwendet werden können, alle hinreichend ähnlichen Proteasen mit einer entsprechend ähnlichen Sequenz zu SEQ ID NO:1 und für sie codierende Nukleinsäuren. Die Erfindung betrifft ferner deren Herstellung sowie Verfahren zur Verwendung dieser Proteasen, deren Verwendung als solche sowie diese enthaltende Mittel, insbesondere Wasch- und Reinigungsmittel. Y1 - 2024 ER - TY - PAT A1 - Berg, Gabriele A1 - Bessler, Cornelius A1 - Gerlach, Jochen A1 - Gübitz, Georg A1 - Heumann, Sonja A1 - Karl, Wolfgang A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Remler, Peter A1 - Ribitsch, Doris A1 - Schwab, Helmut A1 - Siegert, Petra A1 - Wieland, Susanne T1 - Mittel enthaltend Proteasen aus Stenotrophomonas maltophilia [Offenlegungsschrift] T1 - Agents containing proteases from Stenotrophomonas maltophilia [Europäische Patentanmeldung / US Patentanmeldung / Internationale Patentanmeldung] Y1 - 2009 SP - 1 EP - 47 PB - Deutsches Patent- und Markenamt / Europäisches Patentamt / USPTO / WIPO CY - München / Den Hague / Washington / Genf ER - TY - PAT A1 - Siegert, Petra A1 - Evers, Stefan A1 - Marion, Merkel A1 - Mussmann, Nina A1 - Hellmuth, Hendrik A1 - O'Connell, Timothy A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Schwaneberg, Ulrich A1 - Martinez, Ronny A1 - Jakob, Felix T1 - Verfahren zur Anpassung eines hydrolytischen Enzyms an eine das hydrolytische Enzym stabilisierende Komponente [Offenlegungsschrift] T1 - Method for adapting a hydrolytic enzyme to a component that stabilizes the hydrolytic enzyme [Europäische Patentanmeldung / Internationale Patentanmeldung] Y1 - 2013 SP - 1 EP - 27 PB - Deutsches Patent- und Markenamt / Europäisches Patentamt / WIPO CY - München / Den Hague / Genf ER - TY - JOUR A1 - Ribitsch, Doris A1 - Karl, Wolfgang A1 - Birner-Gruenberger, Ruth A1 - Gruber, Karl A1 - Eiteljoerg, Inge A1 - Remler, Peter A1 - Wieland, Susanne A1 - Siegert, Petra A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Schwab, Helmut T1 - C-terminal truncation of a metagenome-derived detergent protease for effective expression in E. coli JF - Journal of biotechnology N2 - Recently, a new alkaline protease named HP70 showing highest homology to extracellular serine proteases of Stenotrophomonas maltophilia and Xanthomonas campestris was found in the course of a metagenome screening for detergent proteases (Niehaus et al., submitted for publication). Attempts to efficiently express the enzyme in common expression hosts had failed. This study reports on the realization of overexpression in Escherichia coli after structural modification of HP70. Modelling of HP70 resulted in a two-domain structure, comprising the catalytic domain and a C-terminal domain which includes about 100 amino acids. On the basis of the modelled structure the enzyme was truncated by deletion of most of the C-terminal domain yielding HP70-C477. This structural modification allowed effective expression of active enzyme using E. coli BL21-Gold as the host. Specific activity of HP70-C477 determined with suc-l-Ala-l-Ala-l-Pro-l-Phe-p-nitroanilide as the substrate was 30 ± 5 U/mg compared to 8 ± 1 U/mg of the native enzyme. HP70-C477 was most active at 40 °C and pH 7–11; these conditions are prerequisite for a potential application as detergent enzyme. Determination of kinetic parameters at 40 °C and pH = 9.5 resulted in KM = 0.23 ± 0.01 mM and kcat = 167.5 ± 3.6 s⁻¹. MS-analysis of peptide fragments obtained from incubation of HP70 and HP70-C477 with insulin B indicated that the C-terminal domain influences the cleavage preferences of the enzyme. Washing experiments confirmed the high potential of HP70-C477 as detergent protease. Y1 - 2010 U6 - https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2010.09.947 SN - 1873-4863 (E-Journal); 0168-1656 (Print) VL - 150 IS - 3 SP - 408 EP - 416 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - JOUR A1 - Ribitsch, Doris A1 - Heumann, Sonja A1 - Trotscha, Eva A1 - Herrero Acero, Enrique A1 - Greimel, Katrin A1 - Leber, Regina A1 - Birner-Gruenberger, Ruth A1 - Deller, Sigrid A1 - Eiteljoerg, Inge A1 - Remler, Peter A1 - Weber, Thomas A1 - Siegert, Petra A1 - Maurer, Karl-Heinz A1 - Donelli, Ilaria A1 - Freddi, Giuliano A1 - Schwab, Helmut A1 - Guebitz, Georg M. T1 - Hydrolysis of polyethyleneterephthalate by p-nitrobenzylesterase from Bacillus subtilis JF - Biotechnology progress Y1 - 2011 SN - 1520-6033 (E-Journal); 8756-7938 (Print) VL - Vol. 27 IS - Iss. 4 SP - 951 EP - 960 PB - Wiley CY - Hoboken ER -