TY - GEN A1 - Stadtmüller, R. A1 - Tippkötter, Nils A1 - Ulber, Roland T1 - Produktion von einzelsträngigen DNA-Makronukleotiden T2 - Chemie Ingenieur Technik N2 - In der Biotechnologie stellt Einzelstrang-DNA (ssDNA) eine Schlüsselrolle dar und fungiert z. B. als Baustein für die nanoskalige Feinmechanik oder als Affinitätsligand, ein sog. Aptamer. Hinsichtlich der industriellen Verwendung bieten Aptamere im Vergleich zu Antikörpern viele Vorteile, wie z. B. eine gute Renaturierung bzw. die Selektion für cytotoxische Moleküle. Aktuell wächst die Nachfrage für chimäre Aptamere von bis zu 200 n, um die simultane Bindung bzw. die Modifikation mehrerer Moleküle zu realisieren. Bis heute wird ssDNA mittels einer sequentiellen Synthese hergestellt, die eine Effizienz von ca. 99,5 % je Zyklus und bereits bei einer Produktlänge von 100 n nur noc hAusbeuten von max. 60 % zeigt. Um dem Bedarf an ssDNA im Bereich > 100 n zu entsprechen, wurden zwei enzymatische Verfahren zur Produktion dieser Makronukleotide entworfen. Die erste Technik basiert auf einerFestphasen-PCR und ermöglicht sowohlein Primer- als auch ein Templatrecycling. Das zweite Verfahren beruht auf einer Plasmidbasierten In-vivo-Amplifikation, der sog. AptaGENE®-Technologie. In einer einzigen Klonierung werden bis zu 100 Kopien des Monomers in einen Vektor kloniert. Nach einer Transformation folgt der reguläre Produktionsprozess in Form einer Kultivierung, Plasmidpräparation und sequenziellen Aufarbeitung von bis zu 6 · 10¹⁵ Makronukleotiden pro Milliliter Fermentationsvolumen. Y1 - 2014 U6 - https://doi.org/10.1002/cite.201450372 SN - 0009-286X SN - 1522-2640 (eISSN) N1 - ProcessNet-Jahrestagung 2014 und 31. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 30. September - 2. Oktober 2014, Eurogress Aachen VL - 86 IS - 9 SP - 1403 PB - Wiley-VCH CY - Weinheim ER - TY - JOUR A1 - Stadler, Andreas M. A1 - Zerlin, Kay A1 - Digel, Ilya A1 - Büldt, Georg A1 - Zaccai, Guiseppe A1 - Artmann, Gerhard T1 - Dynamics and interactions of hemoglobin in red blood cells JF - Tissue Engineering Part A. 14 (2008), H. 5 Y1 - 2008 SN - 1937-3341 N1 - TERMIS EU 2008 Porto Meeting June 22–26, 2008 Porto Congress Center–Alfândega Portugal SP - 724 EP - 724 ER - TY - JOUR A1 - Stadler, Andreas M. A1 - Garvey, G. J. A1 - Bocahut, A. A1 - Sacquin-Mora, S. A1 - Digel, Ilya A1 - Schneider, G. J. A1 - Natali, F. A1 - Artmann, Gerhard A1 - Zaccai, G. T1 - Thermal fluctuations of haemoglobin from different species : adaptation to temperature via conformational dynamics JF - Journal of the Royal Society Interface N2 - Thermodynamic stability, configurational motions and internal forces of haemoglobin (Hb) of three endotherms (platypus, Ornithorhynchus anatinus; domestic chicken, Gallus gallus domesticus and human, Homo sapiens) and an ectotherm (salt water crocodile, Crocodylus porosus) were investigated using circular dichroism, incoherent elastic neutron scattering and coarse-grained Brownian dynamics simulations. The experimental results from Hb solutions revealed a direct correlation between protein resilience, melting temperature and average body temperature of the different species on the 0.1 ns time scale. Molecular forces appeared to be adapted to permit conformational fluctuations with a root mean square displacement close to 1.2 Å at the corresponding average body temperature of the endotherms. Strong forces within crocodile Hb maintain the amplitudes of motion within a narrow limit over the entire temperature range in which the animal lives. In fully hydrated powder samples of human and chicken, Hb mean square displacements and effective force constants on the 1 ns time scale showed no differences over the whole temperature range from 10 to 300 K, in contrast to the solution case. A complementary result of the study, therefore, is that one hydration layer is not sufficient to activate all conformational fluctuations of Hb in the pico- to nanosecond time scale which might be relevant for biological function. Coarse-grained Brownian dynamics simulations permitted to explore residue-specific effects. They indicated that temperature sensing of human and chicken Hb occurs mainly at residues lining internal cavities in the β-subunits. Y1 - 2012 U6 - https://doi.org/10.1098/rsif.2012.0364 SN - 1742-5689 VL - 9 IS - 76 SP - 2845 EP - 2855 PB - The Royal Society CY - London ER - TY - CHAP A1 - Stadler, Andreas M. A1 - Embs, Jan P. A1 - Zerlin, Kay A1 - Digel, Ilya A1 - Artmann, Gerhard A1 - Zaccai, Joe A1 - Büldt, Georg T1 - Temperature transitions of hemoglobin and cytosolic water diffusion in human red blood cells : [poster] N2 - Background Hemoglobin interactions in red blood cells Hemoglobin dynamics in human red blood cells Diffusion of H2O in red blood cells KW - Erythrozyt KW - Hämoglobin KW - cytosolic water diffusion KW - hemoglobin dynamics Y1 - 2007 ER - TY - JOUR A1 - Stadler, Andreas M. A1 - Embs, Jan P. A1 - Digel, Ilya A1 - Artmann, Gerhard A1 - Unruh, Tobias A1 - Büldt, Georg A1 - Zaccai, Guiseppe T1 - Cytoplasmic water and hydration layer dynamics in human red blood cells JF - Journal of the American Chemical Society. 50 (2008), H. 130 Y1 - 2008 SN - 1520-5126 SP - 16852 EP - 16853 ER - TY - JOUR A1 - Stadler, Andreas M. A1 - Digel, Ilya A1 - Embs, Jan P. A1 - Unruh, Tobias A1 - Tehei, M. A1 - Zaccai, G. A1 - Büldt, G. A1 - Artmann, Gerhard T1 - From powder to solution : Hydration dependence of human hemoglobin dynamics correlated to body temperature JF - Biophysical Journal. 96 (2009), H. 12 Y1 - 2009 SN - 0006-3495 SP - 5073 EP - 5081 PB - Cell Press CY - Cambridge, Mass. ER - TY - JOUR A1 - Stadler, Alexander Maximilian A1 - Garvey, Christopher J. A1 - Embs, Jan Peter A1 - Koza, Michael Marek A1 - Unruh, Tobias A1 - Artmann, Gerhard A1 - Zaccai, Guiseppe T1 - Picosecond dynamics in haemoglobin from different species: A quasielastic neutron scattering study JF - Biochimica et biophysica acta (BBA): General Subjects Y1 - 2014 U6 - https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2014.06.007 SN - 1872-8006 (E-Journal); 0304-4165 (Print) VL - 1840 IS - 10 SP - 2989 EP - 2999 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - JOUR A1 - Stadler, A. M. A1 - Digel, Ilya A1 - Artmann, Gerhard A1 - Embs, Jan P. A1 - Zaccai, Joe A1 - Büldt, Georg T1 - Hemoglobin Dynamics in Red Blood Cells: Correlation to Body Temperature JF - Biophysical Journal. 95 (2008), H. 11 Y1 - 2008 SN - 1542-0086 SP - 5449 EP - 5461 ER - TY - JOUR A1 - Staat, Manfred A1 - Wolters, J A1 - Bongarts, W. A1 - Hennings, W. (u.a.) T1 - Überarbeitete probabilistisch orientierte Sicherheitsanalyse für den HTR-Modul JF - Jahrestagung Kerntechnik '90 / Kerntechnische Gesellschaft e.V. ; Deutsches Atomforum e.V Y1 - 1990 SP - 143 EP - 146 PB - INFORUM CY - Bonn ER - TY - JOUR A1 - Staat, Manfred A1 - Vu, Khoi Duc T1 - Limit loads of circumferentially flawed pipes and cylindrical vessels under internal pressure JF - International Journal of Pressure Vessels and Piping. 83 (2006), H. 3 Y1 - 2006 SN - 0308-0161 SP - 188 EP - 196 ER -