TY - JOUR A1 - Aboulnaga, E. A. A1 - Zou, H. A1 - Selmer, Thorsten A1 - Xian, M. T1 - Development of a plasmid-based, tunable, tolC-derived expression system for application in Cupriavidus necator H16 JF - Journal of Biotechnology N2 - Cupriavidus necator H16 gains increasing attention in microbial research and biotechnological application due to its diverse metabolic features. Here we present a tightly controlled gene expression system for C. necator including the pBBR1-vector that contains hybrid promoters originating from C. necator native tolC-promoter in combination with a synthetic tetO-operator. The expression of the reporter gene from these plasmids relies on the addition of the exogenous inducer doxycycline (dc). The novel expression system offers a combination of advantageous features as; (i) high and dose-dependent recombinant protein production, (ii) tight control with a high dynamic range (On/Off ratio), which makes it applicable for harmful pathways or for toxic protein production, (iii) comparable cheap inducer (doxycycline, dc), (iv) effective at low inducer concentration, that makes it useful for large scale application, (v) rapid, diffusion controlled induction, and (vi) the inducer does not interfere within the cell metabolism. As applications of the expression system in C. necator H16, the growth ability on glycerol was enhanced by constitutively expressing the E. coli glpk gene-encoding for glycerol kinase. Likewise, we used the system to overcome the expression toxicity of mevalonate pathway in C. necator H16. With this system, the mevalonate-genes were successfully introduced in the host and the recombinant strains could produce about 200 mg/l mevalonate. Y1 - 2018 U6 - https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2018.03.007 SN - 0168-1656 VL - 274 SP - 15 EP - 27 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - JOUR A1 - Aboulnaga, E. H. A1 - Pinkenburg, O. A1 - Schiffels, Johannes A1 - El-Refai, A. A1 - Buckel, W. A1 - Selmer, Thorsten T1 - Butyrate production in Escherichia coli: Exploitation of an oxygen tolerant bifurcating butyryl-CoA dehydrogenase/electron transferring flavoprotein complex from Clostridium difficile JF - Journal of bacteriology. June 14, 2013 Y1 - 2013 SN - 1098-5530 (E-Journal) ; 0021-9193 (Print) SP - Epub ahead of print ER - TY - JOUR A1 - Abulnaga, El-Hussiny A1 - Pinkenburg, Olaf A1 - Schiffels, Johannes A1 - E-Refai, Ahmed A1 - Buckel, Wolfgang A1 - Selmer, Thorsten T1 - Effect of an Oxygen-Tolerant Bifurcating Butyryl Coenzyme A Dehydrogenase/Electron-Transferring Flavoprotein Complex from Clostridium difficile on Butyrate Production in Escherichia coli JF - Journal of bacteriology Y1 - 2013 SN - 1098-5530 [E-Journal] SN - 0021-9193 [Print] VL - 195 IS - 16 SP - 3704 EP - 3713 ER - TY - JOUR A1 - Adels, Klaudia A1 - Elbers, Gereon A1 - Diehl, Bernd A1 - Monakhova, Yulia T1 - Multicomponent analysis of dietary supplements containing glucosamine and chondroitin: comparative low- and high-field NMR spectroscopic study JF - Analytical Sciences N2 - With the prevalence of glucosamine- and chondroitin-containing dietary supplements for people with osteoarthritis in the marketplace, it is important to have an accurate and reproducible analytical method for the quantitation of these compounds in finished products. NMR spectroscopic method based both on low- (80 MHz) and high- (500–600 MHz) field NMR instrumentation was established, compared and validated for the determination of chondroitin sulfate and glucosamine in dietary supplements. The proposed method was applied for analysis of 20 different dietary supplements. In the majority of cases, quantification results obtained on the low-field NMR spectrometer are similar to those obtained with high-field 500–600 MHz NMR devices. Validation results in terms of accuracy, precision, reproducibility, limit of detection and recovery demonstrated that the developed method is fit for purpose for the marketed products. The NMR method was extended to the analysis of methylsulfonylmethane, adulterant maltodextrin, acetate and inorganic ions. Low-field NMR can be a quicker and cheaper alternative to more expensive high-field NMR measurements for quality control of the investigated dietary supplements. High-field NMR instrumentation can be more favorable for samples with complex composition due to better resolution, simultaneously giving the possibility of analysis of inorganic species such as potassium and chloride. KW - Glucosamine KW - Chondroitin sulfate KW - Polysaccharides KW - Dietary supplements KW - High-field NMR Y1 - 2023 U6 - https://doi.org/10.1007/s44211-023-00433-2 SN - 1348-2246 (Online) SN - 0910-6340 (Print) N1 - Corresponding author: Yulia Monakhova VL - 2023 PB - Springer Verlag CY - Cham ER - TY - JOUR A1 - Adels, Klaudia A1 - Monakhova, Yulia T1 - Low-field NMR spectroscopic study of e-cigarettes: Is determination of only nicotine and organic carrier solvents possible? JF - Microchemical Journal N2 - Electronic cigarettes (e-cigarettes) have become popular worldwide with the market growing exponentially in some countries. The absence of product standards and safety regulations requires urgent development of analytical methodologies for the holistic control of the growing diversity of such products. An approach based on low-field nuclear magnetic resonance (LF-NMR) at 80 MHz is presented for the simultaneous determination of key parameters: carrier solvents (vegetable glycerine (VG), propylene glycol (PG) and water), total nicotine as well as free-base nicotine fraction. Moreover, qualitative and quantitative determination of fourteen weak organic acids deliberately added to enhance sensory characteristics of e-cigarettes was possible. In most cases these parameters can be rapidly and conveniently determined without using any sample manipulation such as dilution, extraction or derivatization steps. The method was applied for 37 authentic e-cigarettes samples. In particular, eight different organic acids with the content up to 56 mg/mL were detected. Due to its simplicity, the method can be used in routine regulatory control as well as to study release behaviour of nicotine and other e-cigarettes constituents in different products. KW - Electronic cigarettes KW - Low field NMR KW - Carrier solvents KW - Free-base nicotine KW - Weak organic acids Y1 - 2024 U6 - https://doi.org/10.1016/j.microc.2024.110859 SN - 1095-9149 N1 - Corresponding author: Yulia Monakhova VL - 203 PB - Elsevier CY - Amsterdam ER - TY - JOUR A1 - Aggarwal, P. A1 - Dhiman, S. A1 - Kumar, G. A1 - Scherer, Ulrich W. A1 - Singla, M. L. A1 - Srivastava, A. T1 - Optical study of poly(ethyleneterephthalate) modified by different ionizing radiation dose JF - Indian Journal of Pure and Applied Physics N2 - Thin films of poly(ethyleneterephthalate) [PET]were exposed to radiation dose ranging from 10 to 30 kGy by using gamma rays in the range 12.8-177.8 MGy using swift light ions of hydrogen. There was no effect of the radiation dose on the optical behaviour of PET as a result of exposure to radiation dose up to 30 kGy brought about by gamma rays but a significant decrease in the optical band gap values was observed when PET was exposed to swift light ions of hydrogen. The data obtained are discussed in terms of optical studies carried out on PET using swift heavy ions. Y1 - 2012 SN - 0019-5596 VL - 50 IS - 2 SP - 129 EP - 132 ER - TY - JOUR A1 - Aggarwal, Prerna A1 - Singh, Virendra A1 - Singh, Arjun A1 - Scherer, Ulrich W. A1 - Singh, Tejvir A1 - Singla, Madan L. A1 - Srivastava, Alok T1 - Physico-chemical transformations in swift heavy ion modified poly(ethyleneterephthalate) JF - Radiation Physics and Chemistry Y1 - 2011 SN - 0969-806X N1 - In Press, Accepted Manuscript SP - 1 EP - 28 PB - Pergamon Press CY - Oxford ER - TY - GEN A1 - Al-Kaidy, H. A1 - Tippkötter, Nils A1 - Kaiser, P. A1 - Wollny, S. A1 - Ulber, Roland T1 - Aufreinigung von Cytochrom P450BMP mittels magnetischer Partikel und die enzymatische Synthese von 9, 10-Dihydroxystearinsäure T2 - Chemie Ingenieur Technik N2 - Cytochrom P450 sind Häm-Proteine, die zur Enzymklasse der Oxidoreduktasen (EC 1.14.xy) gehören. Eine wichtige Reaktion ist die Hydroxylierung nichtaktivierter C–H-Bindungen, die in technischen Systemen von großem Interesse ist. Durch die Verwendung von M-IDA-2-Partikeln ist eine direkte Aufreinigung mit gleichzeitiger Immobilisierung und die Applikation der Enzyme aus dem Zelllysat möglich. Damit ist das Verfahren mehr als fünf Stunden schneller als die konventionelle Chromatographie und mehr als 80 % der Aufreinigungszeit wird gespart. Mit dem isolierten nativen Enzym konnte die Plattformchemikalie 9,10-Dihydroxystearinsäure aus Ölsäure hergestellt werden. Unter anderem für die Kunststoffindustrie können aus diesem Produkt wichtige Monomere wie z. B. Azelainsäure hergestellt werden. Die Bildung des Produkts erfolgt in einem zweiphasigen Reaktionssystem an der Grenzfläche zwischen dem Öl und der wässrigen Phase als Feststoff. Um das immobilisierte Enzym aktiv in die obere Phase zu transportieren, wurde eine neue magnetische Mischvorrichtung entwickelt. Das Reaktionsprodukt wurde mit NMR, GC-MS und HPLC-MS analysiert und mit einem chemisch synthetisierten Standard von 9,10-Dihydroxystearinsäure verglichen. Derzeit werden Studien des immobilisierten Häms des Enzyms durchgeführt. Y1 - 2014 U6 - https://doi.org/10.1002/cite.201450420 SN - 0009-286X SN - 1522-2640 (eISSN) N1 - ProcessNet-Jahrestagung 2014 und 31. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 30. September - 2. Oktober 2014, Eurogress Aachen N1 - Gefördert wird dieses Projekt im Rahmen von MAGNENZ durch das BMBF VL - 86 IS - 9 SP - 1420 PB - Wiley-VCH CY - Weinheim ER - TY - CHAP A1 - Al-Kaidy, H. A1 - Ulber, Roland A1 - Tippkötter, Nils T1 - A platform technology for the automated reaction control in magnetizable micro-fluidic droplets T2 - Biomaterials - made in bioreactors : book of abstracts, May 26 - 28, 2014, Radisson Blu Park Hotel and Conference Dentre, Radebeul, Germany Y1 - 2014 SP - 21 EP - 22 PB - DECHEMA CY - Frankfurt am Main ER - TY - GEN A1 - Al-Kaidy, H. A1 - Ulber, Roland A1 - Tippkötter, Nils T1 - Eine Plattform-Technologie für die automatisierte Reaktionsführung in magnetisierbaren mikrofluidischen Tropfen T2 - Chemie Ingenieur Technik N2 - Üblicherweise werden biotechnologische Reaktionssysteme im mikrofluidischen Maßstab in vorstrukturierten Bauteilen oder mit auf Wellplatten basierenden Robotersystemen realisiert. In dem hier vorgestellten System werden chemische oder biologische Reaktionen mit magnetischen Mikroreaktoren (MR) durchgeführt, bei denen hydrophobe magnetische Mikropartikel einen wässrigen Kern umschließen. Solche MR bieten eine gute Kontrolle der Reaktionsbedingungen, eine verbesserte Sicherheit und Portabilität. Die neue Plattformtechnologie ermöglicht die zweidimensionale Bewegung der magnetischen MR auf einer planaren Ebene. Oberhalb oder unterhalb der Plattform werden Magnetfeldgradienten zum Manipulieren und Bewegen eines oder mehrerer magnetischer MR erzeugt. Die optimal auf die MR wirkenden magnetischen Kräfte werden experimentell ermittelt und simuliert. Die Aktivierung der Magnetfelder wird automatisiert durch elektrische Spulen mit Eisenkern bzw. Neodymmagnet gesteuert. Angewendet wurde das System beim reversiblen Öffnen von MR, um z. B. Reaktionspartner in den wässrigen Kern zu injizieren oder Proben zu entnehmen. Ferner wurde Lac-case A und b-Glucosidase auf einer Quarzglasoberfläche immobilisiert und mit einem MR zum Reagieren gebracht. Weiterhin wurden MR fusioniert und so ein wässriger Kern bestehend aus Laccase mit einem aus dem entsprechenden Substrat Syringaldazin vereint. Y1 - 2014 U6 - https://doi.org/10.1002/cite.201450424 SN - 0009-286X SN - 1522-2640 (eISSN) N1 - ProcessNet-Jahrestagung 2014 und 31. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 30. September - 2. Oktober 2014, Eurogress Aachen VL - 86 IS - 9 SP - 1419 EP - 1420 PB - Wiley-VCH CY - Weinheim ER -