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Optimierung der selektiven Aufarbeitung von Proteinen mit Aptamer-funktionalisierten Magnetpartikeln

  • Die Herstellung pharmakologisch relevanter Proteine durch Mikroorganismen führt eine mehrstufige Aufarbeitung mit sich. Durch die Verwendung von Aptameren, kurzen einzelsträngigen DNA- oder RNA-Oligonukleotiden immobilisiert auf funktionalisierten, wiederverwendbaren Magnetpartikeln, können mehrere dieser Abtrennungsoperationen kombiniert und damit die Prozesskosten minimiert werden. Aufgrund der definierten dreidimensionalen Struktur können Aptamere kleine organische Moleküle hochspezifisch binden. Im vorgestellten Projekt wird die Aufarbeitung von His6-GFP als Modellprotein mithilfe der mit Aptamer funktionalisierten Magnetpartikel durchgeführt. In bisherigen Versuchen wurde die Bindung von Aptameren auf den magnetischen Partikeln sowie die Bindung des Modellproteins GFP auf den Partikeln optimiert. Des Weiteren wurden mehrere Strategien zur Elution des GFPs von den Partikeln verfolgt, um den Proteinertrag zu maximieren und die Partikel rezyklieren zu können. Die Untersuchung unspezifischer Bindungen von Zelltrümmern und Proteinen an die Magnetpartikel wurde mithilfe eines konfokalen Laser-Scanning-Mikroskops durchgeführt.

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Metadaten
Author:S. Wollny, R. Stadtmüller, Nils TippkötterORCiD, J. Oster, P. Kampeis, Roland UlberORCiD
DOI:https://doi.org/10.1002/cite.201250031
ISSN:0009-286X
ISSN:1522-2640 (eISSN)
Parent Title (German):Chemie Ingenieur Technik
Publisher:Wiley-VCH
Place of publication:Weinheim
Document Type:Conference: Meeting Abstract
Language:German
Year of Completion:2012
Date of the Publication (Server):2024/07/01
Volume:84
Issue:8
First Page:1203
Note:
ProcessNet-Jahrestagung 2012 und 30. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 10. – 13. September 2012, Karlsruhe
Link:https://doi.org/10.1002/cite.201250031
Zugriffsart:campus
Institutes:FH Aachen / Fachbereich Chemie und Biotechnologie
collections:Verlag / Wiley-VCH