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Aufreinigung von Cytochrom P450BMP mittels magnetischer Partikel und die enzymatische Synthese von 9, 10-Dihydroxystearinsäure

  • Cytochrom P450 sind Häm-Proteine, die zur Enzymklasse der Oxidoreduktasen (EC 1.14.xy) gehören. Eine wichtige Reaktion ist die Hydroxylierung nichtaktivierter C–H-Bindungen, die in technischen Systemen von großem Interesse ist. Durch die Verwendung von M-IDA-2-Partikeln ist eine direkte Aufreinigung mit gleichzeitiger Immobilisierung und die Applikation der Enzyme aus dem Zelllysat möglich. Damit ist das Verfahren mehr als fünf Stunden schneller als die konventionelle Chromatographie und mehr als 80 % der Aufreinigungszeit wird gespart. Mit dem isolierten nativen Enzym konnte die Plattformchemikalie 9,10-Dihydroxystearinsäure aus Ölsäure hergestellt werden. Unter anderem für die Kunststoffindustrie können aus diesem Produkt wichtige Monomere wie z. B. Azelainsäure hergestellt werden. Die Bildung des Produkts erfolgt in einem zweiphasigen Reaktionssystem an der Grenzfläche zwischen dem Öl und der wässrigen Phase als Feststoff. Um das immobilisierte Enzym aktiv in die obere Phase zu transportieren, wurde eine neue magnetische Mischvorrichtung entwickelt. Das Reaktionsprodukt wurde mit NMR, GC-MS und HPLC-MS analysiert und mit einem chemisch synthetisierten Standard von 9,10-Dihydroxystearinsäure verglichen. Derzeit werden Studien des immobilisierten Häms des Enzyms durchgeführt.

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Metadaten
Author:Huschyar Al-Kaidy, Nils TippkötterORCiD, P. Kaiser, S. Wollny, Roland UlberORCiD
DOI:https://doi.org/10.1002/cite.201450420
ISSN:0009-286X
ISSN:1522-2640 (eISSN)
Parent Title (German):Chemie Ingenieur Technik
Publisher:Wiley-VCH
Place of publication:Weinheim
Document Type:Conference: Meeting Abstract
Language:German
Year of Completion:2014
Date of first Publication:2014/08/28
Volume:86
Issue:9
First Page:1420
Note:
ProcessNet-Jahrestagung 2014 und 31. DECHEMA-Jahrestagung der Biotechnologen, 30. September - 2. Oktober 2014, Eurogress Aachen
Note:
Gefördert wird dieses Projekt im Rahmen von MAGNENZ durch das BMBF
Link:https://doi.org/10.1002/cite.201450420
Zugriffsart:campus
Institutes:FH Aachen / Fachbereich Chemie und Biotechnologie
collections:Verlag / Wiley-VCH